培养基制备操作步骤:(一)准确称量试剂根据不同的菌类和用途,选择适宜的培养基,培养基所需试剂必须纯净。(二)校正pH值将称量好的培养基各种成分放入容器内,标记划线,加热溶解,补充水分,测定酸碱度,常用pH6.8~8.0的精密试纸或酸度计测定。用1NNaOH和1NHCl调节pH值到适宜范围内。(三)过滤将玻璃漏斗置铁架上,再用纱布夹棉花或用滤纸放在漏斗中,将上述培养基倒入其中过滤至透明。(四)分装将过滤后的培养基分装于中试管或三角瓶内(试管内每支装5mL;三角瓶中装100~150ml),塞好棉塞用牛皮纸包扎好,准备灭菌。(五)灭菌培养基的灭菌,常用高压蒸汽灭菌法。一般微生物的营养细胞在水中煮沸后即被杀死,但细菌的芽胞有较强的抗热性,须经高压蒸汽灭菌才能达到彻底灭菌的目的。自动培养基制备器可以快速的准备好灭菌,放入灭菌锅。不锈钢内桶培养基制备器品牌

培养基质量测试:(1)澄清度:水是细胞培养基的溶剂。细胞培养基中的营养成分只有完全溶解于水才能被细胞吸收摄取,细胞才能生长增殖,因此细胞培养基是否溶解以及培养液是否透明澄清直接影响培养基使用。该项目是通过对水溶解后的细胞培养基的澄清度检查,判断细胞培养基的澄清度。按中国药典2005年版二部附录ⅨB进行。(2)pH值:哺乳类动物细胞生长需要合适的酸碱度,pH过高或者过低都会导致细胞死亡。pH值的测定也可以检查细胞培养基的批间差。清大天一标准规定取规定量供试品,用注射用水(水温20℃-30℃)溶解至1L,加入规定量碳酸氢钠到上述溶液中,用与细胞培养基溶液pH值相近的两点标准缓冲液校准后的酸度计进行测定。按中国药典2005年版二部附录ⅥH进行;加入规定量的碳酸氢钠到上述溶液中,按中国药典2005年版二部附录ⅥH进行。贵州琼脂培养基 培养基制备器培养基制备器不存在意外打开,保证了环境和操作者的安全。

灭菌:分装好的培养基应立即进行灭菌。灭菌的方法种类如下:1.高压蒸汽灭菌法:大多数热培养基都可用此法,小量分装时,用121℃、15min;灭菌量大时,用121℃、30min灭菌;含糖类的培养基只能113℃~115℃、15min灭菌,避免糖类遭破坏。2.煮沸灭菌:对含有不耐高温物质的培养基,可使用此方法。3.过滤除菌:以过滤的方法除菌,用无菌操作技术,定量加入培养基。血液、物品可用无菌操作技术抽取,加入冷却到50℃左右的培养基中。培养基含有不耐热的物质时,可用此法。
培养基的制备:复水时不得用铜锅或铁锅,以防有离子混入培养基中,影响微生物的生长;容器的大小需大于复水后培养基总体积的2倍以上,避免在加热溶解过程中,培养基溢出;含有琼脂粉的培养基,在加热溶解之前可以浸泡数分钟;加热培养基时一定要进行搅拌,特别是琼脂类培养基。为避免烧焦和沸腾溢出,对于少量的培养基很好使用沸水浴进行加热。烧糊的培养基营养物质被破坏,并可产生有毒物质,如发现焦化,或未溶解均匀前培养基有溢出,该培养基即不能使用,应重新制备。对于琼脂类培养基进行再融化时应使用沸水浴或流动蒸汽进行加热,很多只能加热两次,第二次再融化后仍未用完的培养基应弃去。培养基pH值的调正:pH因培养基在加热消毒过程中、pH会有所变化。

培养基的类型-根据培养基的用途来区分,可分为选择培养基、增殖培养基、鉴别培养基等。1)选择培养基在培养基中加入某种物质以杀死或抑制不需要的菌种生长的培养基,称之为选择培养基。如链霉素、氯霉素等抑制原核微生物的生长;而制霉菌素、灰黄霉素等能抑制真核微生物的生长;结晶紫能抑制革兰氏阳性细菌的生长等。2)增殖培养基在自然界中,不同种的微生物常生活在一起,为了分离我们所需要的微生物,在普通培养基中加入一些某种微生物特别喜欢的营养物质,以增加这种微生物的繁殖速度,逐渐淘汰其它微生物,这种培养基称为增殖培养基,这种培养基常用于菌种筛选和选择增菌中。在某种程度上讲,增殖培养基也是一种选择培养基。3)鉴别培养基在培养基中加入某种试剂或化学药品,使难以区分的微生物经培养后呈现出明显差别,因而有助开快速鉴别某种微生物。半固体培养基,指在液体培养基中加入少量的凝固剂而配制成的半固体状态的培养基。不锈钢内桶培养基制备器品牌
制备培养基的操作要点:易于控制微生物的生长代谢状态。不锈钢内桶培养基制备器品牌
根据培养基的物理状态来区分,可以分为固体培养基、液体培养基和半固体培养基。1)液体培养基所配制的培养基是液态的,其中的成分基本上溶于水,没有明显的固形物,液体培养基营养成分分布均匀,易于控制微生物的生长代谢状态。2)固体培养基在液体培养基中加入适量的凝固剂即成固体培养基。常用作凝固剂的物质有琼脂、明胶、硅胶等,以琼脂较为常用。固体培养基在实际中用得十分普遍。在实验室中,它被用作微生物的分离、鉴定、检验杂菌、计数、保藏、生物测定等。3)半固体培养基如果把少量的凝固剂加入到液体培养基中,就制成了半固体培养基。以琼脂为例,它的用量在0.2~1%之间。这种培养基有时可用来观察微生物的动力,有时用来保藏菌种。不锈钢内桶培养基制备器品牌
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